Основна разлика - Гел за подреждане срещу разделящ гел
Термините гел за подреждане и разделящ гел се използват за обяснение на техниката SDS-PAGE. SDS-PAGE или натриевият додецил сулфат-полиакриламиден гел електрофореза е лабораторна техника, която се използва за разделяне на протеиновите молекули въз основа на тяхното молекулно тегло. Теорията зад техниката е, че протеините с различно молекулно тегло показват различна скорост на миграция; молекулите с ниско молекулно тегло мигрират по-бързо, докато молекулите с високо молекулно тегло мигрират бавно. Средата за миграция е гел. Има два вида гелове, наречени гел за подреждане и разделящ гел. Ключовата разлика между подреждащия гел и разделящия гел е, че рН на подреждащия гел е 6,8, докато рН на разделителния гел е 8,8.
СЪДЪРЖАНИЕ
1. Общ преглед и ключова разлика
2. Какво е гел за подреждане
3. Какво е гел за разделяне
4. Връзка между гел за подреждане и сепариращ гел
5. Сравнение рамо до рамо - Гел за подреждане срещу разделящ гел в таблична форма
6. Резюме
Какво е гел за подреждане?
Гелът за подреждане е ниско концентриран полиакриламиден гел, който се поставя върху горната част на по-концентрирания гел за разделяне (отделящ гел) в SDS-PAGE техника. Гелът за подреждане се използва за подобряване на разделителната способност на електрофорезата. Разделителната способност се увеличава поради разликата между концентрациите на подреждащия гел и разделителния гел, който влияе върху протеините в пробата. Тъй като концентрацията на полиакриламид в гела за подреждане е ниска, размерът на порите е по-висок. Това също помага за увеличаване на разделянето.
Гелът за подреждане е насипен полиакриламиден гел с големи пори от около 7% полиакриламид. Тези пори не действат като значителна бариера за големите протеинови молекули. Следователно този гел влияе леко върху подвижността на тези протеини. Това прави разделяне в зависимост от подвижността и размера на протеина, като ги концентрира между два гела.
Фигура 01: SDS-PAGE акриламиден гел
РН на подреждащия гел е 6,8. Неговото рН е киселинно от това на разтварящия гел с 2 рН единици. Това рН предполага по-ниска йонна сила и следователно по-високо електрическо съпротивление. Това провокира подвижността на протеините, отколкото другите заредени частици, присъстващи в гела.
Какво е разделящ гел?
Разделителният гел или разделителният гел на SDS-PAGEтехника е високо концентриран полиакриламиден гел, който се поставя върху горната част на ниско концентрирания гел за подреждане. Разделителният гел съдържа голямо количество полиакриламид (10%). РН на този гел се поддържа като рН = 8,8, което е по-високо ниво на рН от това на подреждащия гел.
Фигура 02: Апарат за електрофореза с гел
Когато протеиновите молекули достигнат разделящия гел, миграцията на тези молекули се забавя, тъй като разделящият гел е гел с висока концентрация с малък размер на порите, който може да действа като значителна бариера за движението на протеиновите молекули. Това забавяне позволява на другите протеини да мигрират бавно, за да наваксат, което води до тясна, концентрирана лента между двата гела.
Каква е връзката между подреждането на гел и разделящия гел?
И двата типа гелове за подреждане и разделителния гел се използват в един и същ апарат
Каква е разликата между подреждането и разделянето на гела?
Различна статия Средна преди таблица
Гел за подреждане срещу разделящ гел |
|
| Подреждащият гел е ниско концентриран полиакриламиден гел, който се поставя върху горната част на по-концентрирания разтварящ гел (отделящ гел) в SDS-PAGE техника. | Разделителният гел или разделителният гел на SDS-PAGE техниката е силно концентриран полиакриламиден гел, който се поставя върху горната част на ниско концентриран гел за подреждане. |
| Поставяне | |
| Гелът за подреждане се поставя върху разделителния (разделящ) гел. | Разделящият гел се поставя на дъното на контейнера, използван за гел електрофореза. |
| Концентрация | |
| Концентрацията на подреждащия гел е висока. | Концентрацията на отделящия гел е ниска. |
| Съдържание на полиакриламид | |
| Гелът за подреждане съдържа около 7% полиакриламид. | Разделителният гел съдържа около 10% полиакриламид. |
| рН | |
| РН на подреждащия гел е 6,8. | РН на отделящия гел е 8,8. |
| Размер на порите | |
| Големите размери на порите присъстват в гела за подреждане. | Малки размери на порите присъстват в отделящия гел. |
| Резолюция | |
| Гелът за подреждане дава по-добра разделителна способност. | Разделящият гел дава лоша разделителна способност. |
Резюме - Гел за подреждане срещу разделящ гел
Гелът за подреждане и разделящият гел са два вида полиакриламидни гелове, използвани за по-добро разделяне на протеиновите молекули в дадена проба. Разликата между подреждащия гел и разделящия гел е, че рН на подреждащия гел е 6,8, докато рН на разделителния гел е 8,8.
