Ключова разлика - Капилярна електрофореза срещу гел електрофореза
Електрофорезата е техника, която се използва за разделяне на биомолекули въз основа на заряда на частиците, размера на частиците и формата на частиците. Миграцията на молекулата, известна като електрофоретична подвижност, зависи от вида на използвания полимер / гел, размера на порите, осигуреното напрежение, времето за работа и съотношението на повърхността към обема. Съществуват различни видове техники за електрофореза, базирани на вида на използваната биомолекула. Първият вид електрофореза, която е изобретена, е електрофореза на хартия, където нитроцелулозна хартия се използва като среда за разделяне на биомолекули. Принципът на гел електрофорезата, където гелове с различни размери на порите са били използвани за отделяне на биомолекули, е изобретен по-късно. Техниката на гел електрофореза беше допълнително модифицирана, за да се подобри точността на техниката, и една такава модификация е капилярна електрофореза. Ключовата разлика между капилярната електрофореза и гел електрофорезата е, че гел електрофорезата се извършва във вертикална или хоризонтална равнина, като се използва полимерен гел със стандартен размер на порите, докато капилярната електрофореза се извършва в капилярна тръба с полимерна течност или гел.
СЪДЪРЖАНИЕ
1. Общ преглед и ключова разлика
2. Какво е гел електрофореза
3. Какво е капилярна електрофореза
4. Прилики между капилярна електрофореза и гел електрофореза
5. Равно до сравнение - Капилярна електрофореза срещу гел електрофореза в таблична форма
6. Обобщение
Какво представлява гел електрофорезата?
Гелната електрофореза е техника, използвана за разделяне предимно на нуклеинови киселини, протеини или аминокиселини въз основа на нейния заряд, размер и форма. Тази техника използва физически гел, който е полимерно вещество, като разделителна среда. Най-често използваните гелове са агароза (за разделяне на нуклеинова киселина) и полиакриламид (за разделяне на протеини). Гел електрофоретичният апарат съдържа тава за леене на гел за приготвяне на гел, отливки за подготвяне на кладенците, буферен резервоар, електроди - положителни (анод) и отрицателни (катод) и захранващо устройство. Молекули като ДНК или РНК, които са отрицателно заредени, се движат от катода към анода, а молекулите, които са положително заредени, се движат обратно. Приготвянето на гел се извършва според изискването. Ако се изисква висока разделителна способност или разделяне на молекулите,трябва да се приготви гел с висока концентрация с по-малък размер на порите. Молекулите, отделени върху матрицата на гела, се наблюдават след техника на оцветяване. Отделените молекули се появяват като ленти върху матрицата на гела.
Фигура 01: Гел електрофореза
Гелната електрофореза се използва при молекулярна диагностика като ДНК пръстови отпечатъци, за да се определи наличието на определен ДНК / РНК фрагмент или протеин. Гелната електрофореза също така определя чистотата на извлечената биомолекулна проба. Гел електрофорезата се извършва като предварителен етап за в и хибридизация и като потвърдителен анализ след секвениране.
Какво е капилярна електрофореза?
Капилярна електрофореза е модификация на гел електрофореза, която използва същия принцип на разделяне въз основа на заряда, размера на молекулата, но се извършва в капилярна тръба с гел или течен полимер. Капилярите се приготвят от разтопен силициев диоксид и всяка капилярна тръба има вътрешен диаметър 50-100μm и е с дължина 25-100cm. Пробите се инжектират в капилярната тръба, съдържаща полимерния материал, и се отделят много по-бързо от конвенционалната гел електрофореза. Капилярната система е добре защитена в изолационна обвивка, която предпазва пробата от всякакви замърсявания. Капилярите могат да бъдат напълнени с течни полимери като хидроксиетил целулоза или гелове с висока разделителна способност като полиакриламид. Капилярната електрофореза осигурява по-голяма разделителна способност; следователно разделянето е по-точно. Капилярната електрофореза използва автоматизирана детекторна система чрез спектрофотометричен анализ. Това се дължи на по-високото съотношение на повърхността към обема.
Фигура 02: Капилярна електрофореза
Капилярна електрофореза се използва в ситуации като криминалистика, където се изисква по-висока точност и не се използва често, тъй като е скъпа техника.
Какви са приликите между капилярната електрофореза и гел електрофорезата?
- Разделянето на молекулите и в двете техники се основава на заряда и размера на молекулата.
- И двете техники могат да се използват за разделяне както на нуклеинови киселини, така и на протеини.
- Обемът на пробата и на двете техники е еднакъв.
- И двете техники използват буфер за улесняване на разделянето.
Каква е разликата между капилярна електрофореза и гел електрофореза?
Различна статия Средна преди таблица
Капилярна електрофореза срещу гел електрофореза |
|
| Капилярна електрофореза е техника, която разделя биомолекулите върху капилярна тръба с помощта на течна или гелна полимерна среда. | Гелната електрофореза е техника, която разделя биомолекулите във вертикална или хоризонтална равнина, използвайки полимерна гел среда. |
| Разделяне | |
| При капилярна електрофореза се отделя вътре в капилярна тръба. | При гел електрофорезата разделянето се извършва във вертикална или хоризонтална равнина. |
| Средно разделяне | |
| Течни полимери като хидроксиетилцелулоза се използват при капилярна електрофореза. | Гелове, или агароза, или полиакриламид, се използват като среда при гел електрофореза. |
| Напречно свързване | |
| Висока разделителна способност може да се получи от капилярна електрофореза. | Разделителната способност е ниска при гел електрофорезата. |
| Съотношение на повърхността към обема | |
| Съотношението повърхност / обем е високо при капилярна електрофореза. | Съотношението повърхност / обем е ниско при гел електрофорезата. |
| Техника за откриване | |
| Откриването се извършва чрез спектрофотометрични автоматизирани детектори в капилярна електрофореза. | Оцветяването и наблюдението чрез UV трансилуминатор се извършват като техники за откриване при гел електрофореза. |
Резюме - Капилярна електрофореза срещу гел електрофореза
Молекулярната диагностика играе основна роля в научния свят. Идентифицирането и пречистването на ДНК, РНК и протеини са критични стъпки в диагностичните процедури. Електрофорезата е техника, която разделя и идентифицира биомолекулите както в гел електрофорезата, така и в много напредналата капилярна гел електрофореза. Гел електрофорезата се извършва във вертикална или хоризонтална равнина, като се използва полимерен гел със стандартен размер на порите, докато капилярната електрофореза се извършва в капилярна тръба с полимерна течност или гел. Това е разликата между капилярна електрофореза и гел електрофореза. След завършване на техниката за електрофореза, биомолекулите се обработват допълнително, за да получат информация от по-високо ниво чрез хибридизация или чрез техники като пръстови отпечатъци.
Изтеглете PDF версия на Капилярна електрофореза срещу гел електрофореза
Можете да изтеглите PDF версия на тази статия и да я използвате за офлайн цели според бележката към цитата. Моля, изтеглете PDF версия тук Разлика между гел електрофореза и капилярна електрофореза.
