Разлика между капилярна електрофореза и гел електрофореза

2024 Автор: Mildred Bawerman | [email protected]. Последно модифициран: 2023-12-16 08:37

Ключова разлика - Капилярна електрофореза срещу гел електрофореза

Електрофорезата е техника, която се използва за разделяне на биомолекули въз основа на заряда на частиците, размера на частиците и формата на частиците. Миграцията на молекулата, известна като електрофоретична подвижност, зависи от вида на използвания полимер / гел, размера на порите, осигуреното напрежение, времето за работа и съотношението на повърхността към обема. Съществуват различни видове техники за електрофореза, базирани на вида на използваната биомолекула. Първият вид електрофореза, която е изобретена, е електрофореза на хартия, където нитроцелулозна хартия се използва като среда за разделяне на биомолекули. Принципът на гел електрофорезата, където гелове с различни размери на порите са били използвани за отделяне на биомолекули, е изобретен по-късно. Техниката на гел електрофореза беше допълнително модифицирана, за да се подобри точността на техниката, и една такава модификация е капилярна електрофореза. Ключовата разлика между капилярната електрофореза и гел електрофорезата е, че гел електрофорезата се извършва във вертикална или хоризонтална равнина, като се използва полимерен гел със стандартен размер на порите, докато капилярната електрофореза се извършва в капилярна тръба с полимерна течност или гел.

СЪДЪРЖАНИЕ

1. Общ преглед и ключова разлика

2. Какво е гел електрофореза

3. Какво е капилярна електрофореза

4. Прилики между капилярна електрофореза и гел електрофореза

5. Равно до сравнение - Капилярна електрофореза срещу гел електрофореза в таблична форма

6. Обобщение

Какво представлява гел електрофорезата?

Гелната електрофореза е техника, използвана за разделяне предимно на нуклеинови киселини, протеини или аминокиселини въз основа на нейния заряд, размер и форма. Тази техника използва физически гел, който е полимерно вещество, като разделителна среда. Най-често използваните гелове са агароза (за разделяне на нуклеинова киселина) и полиакриламид (за разделяне на протеини). Гел електрофоретичният апарат съдържа тава за леене на гел за приготвяне на гел, отливки за подготвяне на кладенците, буферен резервоар, електроди - положителни (анод) и отрицателни (катод) и захранващо устройство. Молекули като ДНК или РНК, които са отрицателно заредени, се движат от катода към анода, а молекулите, които са положително заредени, се движат обратно. Приготвянето на гел се извършва според изискването. Ако се изисква висока разделителна способност или разделяне на молекулите,трябва да се приготви гел с висока концентрация с по-малък размер на порите. Молекулите, отделени върху матрицата на гела, се наблюдават след техника на оцветяване. Отделените молекули се появяват като ленти върху матрицата на гела.

Фигура 01: Гел електрофореза

Гелната електрофореза се използва при молекулярна диагностика като ДНК пръстови отпечатъци, за да се определи наличието на определен ДНК / РНК фрагмент или протеин. Гелната електрофореза също така определя чистотата на извлечената биомолекулна проба. Гел електрофорезата се извършва като предварителен етап за в и хибридизация и като потвърдителен анализ след секвениране.

Какво е капилярна електрофореза?

Капилярна електрофореза е модификация на гел електрофореза, която използва същия принцип на разделяне въз основа на заряда, размера на молекулата, но се извършва в капилярна тръба с гел или течен полимер. Капилярите се приготвят от разтопен силициев диоксид и всяка капилярна тръба има вътрешен диаметър 50-100μm и е с дължина 25-100cm. Пробите се инжектират в капилярната тръба, съдържаща полимерния материал, и се отделят много по-бързо от конвенционалната гел електрофореза. Капилярната система е добре защитена в изолационна обвивка, която предпазва пробата от всякакви замърсявания. Капилярите могат да бъдат напълнени с течни полимери като хидроксиетил целулоза или гелове с висока разделителна способност като полиакриламид. Капилярната електрофореза осигурява по-голяма разделителна способност; следователно разделянето е по-точно. Капилярната електрофореза използва автоматизирана детекторна система чрез спектрофотометричен анализ. Това се дължи на по-високото съотношение на повърхността към обема.

Фигура 02: Капилярна електрофореза

Капилярна електрофореза се използва в ситуации като криминалистика, където се изисква по-висока точност и не се използва често, тъй като е скъпа техника.

Какви са приликите между капилярната електрофореза и гел електрофорезата?

• Разделянето на молекулите и в двете техники се основава на заряда и размера на молекулата.
• И двете техники могат да се използват за разделяне както на нуклеинови киселини, така и на протеини.
• Обемът на пробата и на двете техники е еднакъв.
• И двете техники използват буфер за улесняване на разделянето.

Каква е разликата между капилярна електрофореза и гел електрофореза?

Различна статия Средна преди таблица

Капилярна електрофореза срещу гел електрофореза
Капилярна електрофореза е техника, която разделя биомолекулите върху капилярна тръба с помощта на течна или гелна полимерна среда.	Гелната електрофореза е техника, която разделя биомолекулите във вертикална или хоризонтална равнина, използвайки полимерна гел среда.
Разделяне
При капилярна електрофореза се отделя вътре в капилярна тръба.	При гел електрофорезата разделянето се извършва във вертикална или хоризонтална равнина.
Средно разделяне
Течни полимери като хидроксиетилцелулоза се използват при капилярна електрофореза.	Гелове, или агароза, или полиакриламид, се използват като среда при гел електрофореза.
Напречно свързване
Висока разделителна способност може да се получи от капилярна електрофореза.	Разделителната способност е ниска при гел електрофорезата.
Съотношение на повърхността към обема
Съотношението повърхност / обем е високо при капилярна електрофореза.	Съотношението повърхност / обем е ниско при гел електрофорезата.
Техника за откриване
Откриването се извършва чрез спектрофотометрични автоматизирани детектори в капилярна електрофореза.	Оцветяването и наблюдението чрез UV трансилуминатор се извършват като техники за откриване при гел електрофореза.

Резюме - Капилярна електрофореза срещу гел електрофореза

Молекулярната диагностика играе основна роля в научния свят. Идентифицирането и пречистването на ДНК, РНК и протеини са критични стъпки в диагностичните процедури. Електрофорезата е техника, която разделя и идентифицира биомолекулите както в гел електрофорезата, така и в много напредналата капилярна гел електрофореза. Гел електрофорезата се извършва във вертикална или хоризонтална равнина, като се използва полимерен гел със стандартен размер на порите, докато капилярната електрофореза се извършва в капилярна тръба с полимерна течност или гел. Това е разликата между капилярна електрофореза и гел електрофореза. След завършване на техниката за електрофореза, биомолекулите се обработват допълнително, за да получат информация от по-високо ниво чрез хибридизация или чрез техники като пръстови отпечатъци.

Изтеглете PDF версия на Капилярна електрофореза срещу гел електрофореза

Можете да изтеглите PDF версия на тази статия и да я използвате за офлайн цели според бележката към цитата. Моля, изтеглете PDF версия тук Разлика между гел електрофореза и капилярна електрофореза.