Ключова разлика - хоризонтална срещу вертикална гел електрофореза
Гелната електрофореза е лабораторна техника, използвана в генетиката за разделяне на смеси, съдържащи ДНК, РНК и други протеини, в зависимост от техния заряд и молекулен размер. ДНК, РНК или протеини, които трябва да бъдат разделени при този метод, се прекарват през гел, който съдържа малки пори. Молекулите се задвижват през гела от електрическо поле. Молекулите преминават през порите на гела и скоростта на движение е обратно пропорционална на съответните им дължини. Следователно молекулите с по-нисък молекулен размер ще се движат по-бързо от молекулите с по-високо молекулно тегло. Електрическото поле се генерира от разликата в заряда в двата края на гела. Единият край съдържа положителен заряд, а другият край съдържа отрицателен заряд. Тъй като ДНК и РНК молекулите са отрицателно заредени,те ще бъдат привлечени към положително заредения край на гела. Гел електрофорезата може да бъде два различни метода: хоризонтална гел електрофореза и вертикална гел електрофореза. При хоризонталната гел електрофореза гелът присъства в хоризонтална ориентация и е потопен в непрекъснато работещ буфер, който присъства вътре в самата кутия с гел. При вертикалната гелна електрофореза буферната система е ориентирана вертикално и е прекъсната с две камери, разположени отгоре и отдолу съответно с катод и анод. Това е ключовата разлика между хоризонталната и вертикалната гел електрофореза.гелът присъства в хоризонтална ориентация и е потопен в непрекъснато работещ буфер, който се намира вътре в самата кутия с гел. При вертикалната гел електрофореза буферната система е ориентирана вертикално и е прекъсната с две камери, разположени отгоре и отдолу съответно с катод и анод. Това е ключовата разлика между хоризонталната и вертикалната гел електрофореза.гелът присъства в хоризонтална ориентация и е потопен в непрекъснато работещ буфер, който се намира вътре в самата кутия с гел. При вертикалната гелна електрофореза буферната система е ориентирана вертикално и е прекъсната с две камери, разположени отгоре и отдолу съответно с катод и анод. Това е ключовата разлика между хоризонталната и вертикалната гел електрофореза.
СЪДЪРЖАНИЕ
1. Общ преглед и ключова разлика
2. Какво е хоризонтална гел електрофореза
3. Какво е вертикална гел електрофореза
4. Прилики между хоризонтална и вертикална гел електрофореза
5. Сравнение едно до друго - хоризонтална и вертикална гел електрофореза в таблична форма
6. Резюме
Какво представлява хоризонталната гел електрофореза?
Хоризонталната гел електрофореза използва основната теория за разделяне на ДНК, РНК или протеинови молекули според съответния им молекулен размер и заряд. При тази техника гелът присъства в хоризонтална ориентация и се потапя в непрекъснат буфер. Агарозният гел се използва за разделяне на кутията с гел на две отделения. Единият край на кутията с гел съдържа анод, докато другият край съдържа катод. Когато се прилага ток, буферът, използван в тази техника, позволява създаването на градиент на заряда. Когато се приложи зареждането, гелът има тенденция да се нагрява. Буферът функционира и като охлаждаща течност, която поддържа температурата на оптимални нива. Рециркулацията на работещия буфер предотвратява образуването на градиент на рН. Непрекъсната буферна система не може да се използва при хоризонтална гел електрофореза, тъй като двете отделения на гелната система се свързват с работещия буфер. Акриламид се използва по време на гел електрофореза за разделяне на протеинови смеси.
Фигура 01: Хоризонтална гел електрофореза
При хоризонталната гел електрофореза акриламидът не може да се използва, тъй като кутията с гел е изложена на кислород. Поради наличието на кислород, полимеризацията на акриламид се инхибира и това пречи на образуването на гела. Хоризонталната гел електрофореза е метод без усилие, който се използва при разделянето на ДНК и РНК.
Какво представлява вертикалната гел електрофореза?
Техниката на вертикална гел електрофореза функционира съгласно първичната теория на гел електрофорезата, но се счита, че е по-сложна от хоризонталния метод на гел електрофореза. Тази техника използва прекъснат буфер. Катодът е разположен в горната камера, а анодът е разположен в долната камера. Наличните във всяко отделение електроди осигуряват необходимото електрическо поле. Между двете монтирани стъклени плочи се излива тънък слой гел. Следователно горната част на гела е потопена в горната камера, а долната част на гела е потопена в камерата отдолу. След като се приложи токът, малка част от буфера се премества в долната камера от горната камера през гела. Токът, приложен в тази техника, е от минутни единици.
Фигура 02: Вертикална гел електрофореза
При вертикалната гел електрофореза буферът тече само през гела. Това позволява точен контрол на градиента на напрежението по време на етапа на разделяне. Акриламиден гел може да се използва, тъй като отделенията не са изложени на атмосферен кислород. Поради по-малкия размер на порите на акриламидния гел, може да се постигне прецизно разделяне с по-висока разделителна способност.
Какви са приликите между хоризонталната и вертикалната гел електрофореза?
- И двете системи функционират според основната теория на гел електрофорезата.
- Анодът и катодът се използват за осигуряване на необходимото електрическо поле и в двете системи.
Каква е разликата между хоризонталната и вертикалната гел електрофореза?
Различна статия Средна преди таблица
Хоризонтална срещу вертикална гел електрофореза |
|
| Хоризонталната гел електрофореза е техника на гел електрофореза, при която гелът присъства в хоризонтална ориентация. | Вертикалната гел електрофореза е техника на гел електрофореза, при която гелът е ориентиран вертикално. |
| Буфер | |
| Хоризонталната гел електрофореза се състои от непрекъснат буфер. | Текущият буфер е прекъснат при вертикална гел електрофореза. |
| Използване на акриламид | |
| Акриламидът не може да се използва за хоризонтална гел електрофореза, тъй като кутията с гел е изложена на атмосферен кислород. | Тъй като гелът не е изложен на атмосферен кислород поради две отделни камери, акриламидът може да бъде използван за вертикална гел електрофореза. |
| Функция | |
| Хоризонталната гел електрофореза се използва по-често за разделяне на ДНК и РНК смеси, но не и протеини. | Вертикалната гел електрофореза се използва за разделяне на смеси от протеини. |
Резюме - Хоризонтална срещу вертикална гел електрофореза
Гелната електрофореза е лабораторна техника, която се използва широко при разделянето на смеси, съдържащи молекули на ДНК, РНК и протеини. Има два метода на гел електрофореза: хоризонтална и вертикална гел електрофореза. При хоризонталната гел електрофореза работещият буфер е непрекъснат, докато при вертикалната гел електрофореза той е прекъснат. Това е разликата между хоризонталната и вертикалната гел електрофореза. И двете системи функционират според общия принцип на гел електрофорезата.
Изтеглете PDF версия на хоризонтална срещу вертикална гел електрофореза
Можете да изтеглите PDF версия на тази статия и да я използвате за офлайн цели според бележката към цитата. Моля, изтеглете PDF версия тук Разлика между хоризонталната и вертикалната гел електрофореза.
