Основна разлика - Gram Stain срещу Acid Fast
Бактериите са много малки микроорганизми. Те са прозрачни и тяхното откриване е трудно при условия на живот и неоцветяване. По този начин се разработват различни методи за оцветяване, за да се улесни откриването на бактерии. Има три основни типа техники на оцветяване: просто оцветяване, диференциално оцветяване и структурно оцветяване. Диференциалното оцветяване е техника, която използва повече от едно петно за диференциране на бактериите. Грам оцветяването и оцветяването с киселини са най-популярни като диференциални оцветявания. Грам оцветяването е диференциална техника на оцветяване, която разделя бактериите на две групи, известни като Грам-положителни бактерии и Грам-отрицателни бактерии. Киселинно-бързото оцветяване е диференциално оцветяване, използвано за идентифициране на киселинно-устойчиви организми, като Mycobacterium, от некиселинно бързи организми. Това е ключовата разлика между оцветяването по Gram и Acid Fast.
СЪДЪРЖАНИЕ
1. Общ преглед и ключова разлика
2. Какво е оцветяване по Грам
3. Какво е киселинно бързо
4. Прилики между оцветяване по Грам и бързо киселинно
5. Сравнение едно до друго - Грам оцветяване срещу киселинно бързо в таблична форма
6. Резюме
Какво е Gram Stain?
Грам оцветяването е важна техника за диференциално оцветяване, използвана за бактериална идентификация в микробиологията. Тази техника е въведена от датския бактериолог Ханс Кристиан Грам през 1884. Грам оцветяването категоризира бактериите в две основни групи, наречени грам положителни и грамотрицателни, които са много важни при класифицирането и идентифицирането на бактериите. Микробиолозите извършват оцветяване с грам като начална стъпка в характеризирането на бактериите по време на проучванията си.
Бактериите се групират въз основа на разликите в клетъчната им стена. Грам-положителните бактерии се състоят от дебел пептидогликанов слой в клетъчната им стена, докато грам-отрицателните бактерии се състоят от тънък пептидогликанов слой в клетъчната им стена. Резултатът от оцветяването с грам ще се основава на разликата в дебелината на пептидогликановия слой на клетъчната стена.
Оцветяването по грамове се извършва с помощта на четири различни реагенти, а именно; основно петно, морилка, обезцветяващо средство и противооцветяване. Кристално виолетово и сафранин се използват като първични и съответно петна, докато грамовете йод и 95% алкохол се използват съответно като морилка и обезцветител. Основните стъпки на петна от грамове са както следва;
- На чиста стъклена стъклена подложка се приготвя бактериална намазка, затопля се и се охлажда.
- Намазката се залива с кристално виолетово за 1-2 минути.
- Намазването се изплаква с бавно течаща вода от чешмата, за да се премахнат излишните петна.
- Грам йод се нанася върху цитонамазката за 1 минута.
- Намазването се изплаква с бавно течаща чешмяна вода
- Намазката се измива с 95% алкохол за 2 - 5 секунди и се изплаква с бавно течаща чешмяна вода.
- Намазването се оцветява със сафранин за 1 минута
- Намазката се изплаква с бавно течаща чешмяна вода, изсушава се и се наблюдава под микроскоп.
В края на грам петно, грам отрицателни бактерии ще се наблюдават в розов цвят, докато грам положителни бактерии ще се наблюдават в лилав цвят.
Фигура 01: Грам отрицателни и Грам положителни бактерии
Резултатът от оцветяването в грамове се определя от дебелината на пептидогликановия слой в клетъчната им стена. По време на стъпката на обезцветяване първичното петно и морилката лесно се отстраняват от грам-отрицателните бактерии и стават безцветни, тъй като имат тънък пептидогликанов слой. Основното петно се задържа в грам положителните бактерии, тъй като те имат дебел пептидогликанов слой. Обратното оцветяване няма да бъде ефективно за грам положителни бактерии поради задържането на основното петно. По този начин, грамоположителните бактерии ще бъдат видими в основния цвят на петна, т.е. в лилав цвят. Обратното петно ще оцвети грам-отрицателните бактерии и те ще бъдат видими в цвят за избор, който е цветът на сафранин. Следователно е лесно да се категоризират бактериите в две групи по грамово оцветяване и е ценно за бактериална диференциация и идентификация.
Какво е Acid Fast?
Киселинната устойчивост е физическо свойство на някои бактерии, по-специално тяхната устойчивост на обезцветяване от киселини по време на процедурите за оцветяване. Веднъж оцветени, тези организми се противопоставят на разредени на киселина и / или етанол процедури за обезцветяване, често срещани в много протоколи за оцветяване. По този начин наименованието „киселинно бързо“се дава на тези организми. Това свойство се проявява поради наличието на високо ниво на восъчен материал (миколова киселина) в клетъчните им стени. Този тест е от решаващо значение за идентифициране на Mycobacterium tuberculosis.
Фигура 2: Микобактерии с бърза киселина
Това киселинно бързо оцветяване е разработено от Paul Ehrlich през 1882 г. Технологията на Ehrlich за бързо действие е модифицирана от Ziehl-Neelsen и сега се използва по-често. Процедурата за бързо оцветяване с киселина включва три различни реагента. Carbol fuschin се използва като основно петно. Като обезцветяващо средство се използва киселинен алкохол. Метиленовото синьо се използва като противооцветяване. Процедурата за оцветяване се извършва, както следва.
- Първичното оцветяване (карбол фуксин) се нанася върху фиксирания образец на предметното стъкло (Всички клетки ще бъдат оцветени в червен цвят).
- Плъзгачът се загрява чрез пара в продължение на 5 минути, което забива петната в клетките правилно.
- След това се добавя разтвор за обезцветяване (Това премахва червеното багрило от всички клетки, с изключение на киселинните бактерии).
- Метиленовото синьо се добавя като контра петно (Оцветява всички обезцветени бактериални клетки).
- Киселинно-устойчивите бактерии остават червени, докато некиселинно-устойчивите бактерии оцветяват в синьо.
Какви са приликите между оцветяването на Грам и киселината бързо?
- Грам оцветяване и киселинно бързо са две техники за диференциално оцветяване.
- И двете техники класифицират бактериите в две групи.
- И двете техники използват две петна и едно обезцветяване.
Каква е разликата между бързо оцветяване по Грам и киселина?
Различна статия Средна преди таблица
Gram Stain срещу Acid Fast |
|
| Грам оцветяването е диференциална техника на оцветяване, която разделя бактериите на две групи Грам-положителни бактерии и Грам-отрицателни бактерии. | Киселинно бързо оцветяване е диференциално оцветяване, използвано за идентифициране на киселинно устойчиви организми от некиселинно бързи организми. |
| Основно петно | |
| Кристално виолетово е често използваното основно петно при оцветяване с грам. | Carbol fuchsin е основното петно, използвано в киселина бързо. |
| Обезцветяващ агент | |
| 95% алкохол се използва като обезцветяващо средство в грамово оцветяване. | Киселинният алкохол се използва като обезцветяващ агент в киселина бързо. |
| Брояч на петна | |
| Оцветяването по Грам използва сафранин като противооцветяване. | Киселинно бързо оцветяване използва метиленово синьо като противооцветяване. |
| Наблюдение | |
| Грам отрицателни бактерии се наблюдават в цвят на пикиране, а грам положителни бактерии се наблюдават в лилав цвят. | Киселинно бързите бактерии се наблюдават в червен цвят, а не киселинно бързите бактерии се наблюдават в синия цвят. |
Резюме - Gram Stain срещу Acid Fast
Визуализацията на микроорганизмите в живо състояние е трудна. Следователно, биологичните петна и процедури за оцветяване се използват широко за изследване на техните свойства. Диференциалното оцветяване е един вид техника на оцветяване, използвана за диференциране на бактериите. Грам оцветяване и киселинно бързо оцветяване са две диференциални техники за оцветяване. Грам оцветяването разграничава грам отрицателни бактерии и грам положителни бактерии въз основа на дебелината на техните клетъчни стени. Киселинно бързо оцветяване разграничава киселинно бързите бактерии от не киселинно бързите бактерии въз основа на съдържанието на миколова киселина в клетъчната стена. Това е разликата между киселинно бързо и грамово оцветяване.
Изтеглете PDF версия на Gram Stain vs Acid Fast
Можете да изтеглите PDF версия на тази статия и да я използвате за офлайн цели според бележката към цитата. Моля, изтеглете PDF версия тук Разлика между грам оцветяване и киселина бързо.
