Ключова разлика - In Situ хибридизация срещу имунохистохимия
Диагностиката на рака и инфекциозните заболявания е популярна тенденция, при която се използват нови техники, базирани на протеомика и геномика, с цел идентифициране на тумори или инфекциозни клетки, тяхното разпространение и местата на клетъчно развитие и анализиране на генетичната основа на повечето заразни и незаразни заболявания. Това ще доведе до точна обработка и проектиране на лекарства и до разработване на персонализирани терапии за заболявания. In situ хибридизация (ISH) и имунохистохимия (IHC) са две такива широко използвани техники в биологията на рака и ключовата разлика между in situ хибридизация и имунохимия се крие в молекулите, които се използват в процедурата за анализ. В ISH сондите за нуклеинова киселина се използват при анализ, докато при IHC за диагностично определяне се използват моноклонални и поликлонални антитела.
СЪДЪРЖАНИЕ
1. Общ преглед и ключова разлика
2. Какво е In Situ хибридизация
3. Какво е имунохистохимия
4. Прилики между In Situ хибридизация и имунохистохимия
5. Равно до сравнение - In Situ хибридизация срещу имунохистохимия в таблична форма
6. Резюме
Какво е In Situ хибридизация (ISH)?
In situ хибридизацията е техника за хибридизация на нуклеинова киселина, която се извършва директно върху част или участък от тъкан, в цялата тъкан или в клетките. Техниката зависи от теорията на допълнителното сдвояване на базата на Уотсън Крик, което води до ДНК-ДНК хибриди или ДНК-РНК хибриди, които могат да открият мутирали гени или да идентифицират необходимия ген от интерес. Едноверижни ДНК последователности, двуверижни ДНК последователности, едноверижни РНК последователности или синтетични олигонуклеотидни последователности се използват като сонди по време на хибридизационната техника и тези сонди са маркирани с радиоактивен фосфор в неговия 5 'край за процедури за идентификация при авторадиография или маркирани с флуоресцентни багрила. Налични са различни видове ISH техники въз основа на типа на използваната сонда и вида на техниката на визуализация, която се следва.
Фигура 01: Флуоресцентна In Situ хибридизация
Има много приложения на ISH, главно в молекулярната диагностика на инфекциозни заболявания, за да се идентифицира наличието на патогени и да се потвърди патогенът чрез молекулярна диагностика. Използва се също в областта на биологията на развитието, кариотипирането и филогенетичния анализ и физическото картографиране на хромозомите.
Какво е имунохистохимия (IHC)?
В техниката на IHC основната анализирана молекула е антигенът. По време на IHC се използват моноклонални и поликлонални антитела, за да се определи наличието на антигени при инфекция или статус на злокачествена клетъчна пролиферация. Техниката се основава на свързване антиген-антитяло и за тази техника се използват ензимни етикети; едно такова приложение е ELISA (ензимно свързан имуносорбентен анализ). Маркерите могат да бъдат и флуоресцентно маркирани антитела или радиомаркирани антитела.
Фигура 02: Имунохистохимия
IHC се използва широко за откриване на ракови клетки. Диагностичните процедури са насочени към антигените, присъстващи в туморните клетки, за да идентифицират и характеризират тумора. Същата процедура е включена за диагностициране на инфекциозни агенти. Моноклоналните и поликлоналните антитела също се използват за анализ на различни генни продукти чрез активиране на реакцията на свързване на антитяло-антиген между желания протеин и приложеното синтетично антитяло.
Какви са приликите между In Situ хибридизация и имунохистохимия?
- ISH и IHC са силно специфични реакции.
- И двете техники са изключително точни.
- И двете техники могат да се използват при диагностика на рак и инфекциозни заболявания.
- Тези техники се извършват в стерилна среда in vitro.
- И двете са бързи техники, които осигуряват възпроизводими резултати.
- ISH и IHC използват методи за откриване като радиомаркиране и флуоресцентни техники.
Каква е разликата между In Situ хибридизация и имунохистохимия?
Различна статия Средна преди таблица
In Situ Хибридизация срещу имунохистохимия |
|
| ISH е техника за хибридизация на нуклеинова киселина, която се извършва директно върху част или част от тъкан или цялата тъкан. | IHC е техника, при която моноклонални и поликлонални антитела се използват за определяне на присъствието на антигени, които са специални белтъчни маркери, поставени върху клетъчните повърхности. |
| Вид на анализираните био молекули | |
| ISH анализира нуклеинови киселини. | IHC анализира протеини-антигени. |
| Основа на биохимичната реакция | |
| При тази техника възниква допълнително сдвояване на база между ДНК-ДНК или ДНК-РНК. | Взаимодействията антиген-антитела участват в имунохистохимията. |
| Методи за откриване, свързани с ензими | |
| Ензимно свързани методи за откриване не могат да се използват в ISH. | В IHC могат да се използват ензимно свързани методи за откриване. |
Резюме - In Situ хибридизация срещу имунохистохимия
Молекулярната диагностика е бърз и потвърждаващ метод, който може да се използва за идентифициране на незаразно заболяване като рак или заразно заболяване като ХИВ или туберкулоза въз основа на молекулярните маркери, присъстващи върху клетките, които водят до проявата на болестта. Молекулярните маркери могат да присъстват под формата на експресирани протеини или на генетично ниво, въз основа на което се въвеждат различни нови техники за повишаване на ефективността и са по-малко трудоемки, въпреки че тези техники имат висока цена. По този начин ISH зависи от образуването на ДНК-ДНК или ДНК-РНК хибрид, а IHC зависи от специфичните реакции между антитяло и антиген. Това е разликата между in situ хибридизация.
Изтеглете PDF версия на In Situ хибридизация срещу имунохистохимия
Можете да изтеглите PDF версия на тази статия и да я използвате за офлайн цели според бележката към цитата. Моля, изтеглете PDF версия тук Разлика между In situ хибридизация и имунохистохимия.
