Ключова разлика - HPLC срещу LCMS
Нека първо разгледаме значението на HPLC и LCMS, преди да анализираме разликата между HPLC и LCMS. Хроматографията е техника за разделяне при химичен анализ, при която съставните части на пробата се разделят по време на преминаването през хроматографска среда. Той също така включва взаимодействие с пробата, стационарна фаза и подвижна фаза. HPLC означава високоефективна течна хроматография и се използва като метод на течна хроматография в аналитичната химия. Комбинацията от течна хроматография и масспектроскопия (LCMS) е разработена за количествения анализ на избрани биомолекули и е изключително чувствителна, точна и специфична процедура за анализ в сравнение с HPLC. Това е ключовата разлика между HPLC и LCMC. Тази статия ще ви запознае с HPLC и LCMC, които се занимават с химически анализ и ще обсъдят разликите между HPLC и LCMS.
Какво е HPLC?
Високопроизводителната течна хроматография (HPLC) е популярна техника за разделяне в аналитичната химия. Използва се главно за разделяне на компонентите, за идентифициране и количествено определяне на всеки компонент в смес. По-рано този метод беше известен като течна хроматография под високо налягане, тъй като зависи от помпите да текат течен разтворител под налягане, съдържащ пробната смес през колона, пълна с твърд адсорбиращ материал. Всяка съставка в сместа за проби взаимодейства по различен начин с твърдия адсорбиращ материал, което води до различни скорости на потока за различните съставки. Това може да доведе до отделяне на съставните части, когато те изтичат от HPLC колоната.
HPLC се използва за различни приложения като анализ на нивата на витамин D в кръвта, незаконна употреба на наркотици от спортисти чрез откриване на остатъци от наркотици в урината им, сортиране на съставките на сложна биологична проба за изследователски цели и анализ и производство на фармацевтични продукти.
Какво е LCMS?
Течната хроматография – масспектрометрия (LCMS) е аналитична техника, която съчетава физическите способности за разделяне на течната хроматография с способностите за мас-анализ на масспектрометрията (MS). Течната хроматография е техника на разделяне, а масспектрометрията се използва за анализ на съотношението маса-заряд на заредените частици. Физическото разделяне обикновено се постига чрез HPLC и алтернативно, LCMS, известен също като HPLC-MS. LCMS е доминираща аналитична техника, която има много висока точност, чувствителност и специфичност в сравнение с HPLC. По този начин е полезен в много приложения като изследователски цели, анализ на лекарства, анализ на храни и др. LCMS се използва главно за отделяне, за откриване, идентифициране и количествено определяне на биохимичните свойства на определена проба в присъствието на сложни химически смеси.
Каква е разликата между HPLC и LCMC?
Съкращение и дефиниция на HPLC и LCMC
HPLC: HPLC означава високоефективна течна хроматография. Това е техника за разделяне, която се използва главно за разделяне на компонентите, за идентифициране и количествено определяне на всеки компонент в смес.
LCMS: LCMS означава течна хроматография и масспектрометрия. Това е аналитична техника, която съчетава физическите способности за разделяне на течната хроматография с способностите за мас-анализ на масова спектрометрия (MS).
Характеристики на HPLC и LCMC
Класификация
HPLC: Това е само метод на течна хроматография.
LCMS: Това е комбинация от метод на течна хроматография и метод на масова спектрометрия.
Ефективност
HPLC: В сравнение с LCMS, HPLC анализът е по-малко ефективен и по-бавен.
LCMS: В сравнение с HPLC, LCMS анализът е ефективен и по-бърз.
Чувствителност
HPLC: В сравнение с LCMS, HPLC анализът е по-малко чувствителен.
LCMS: В сравнение с HPLC, LCMS анализът е по-чувствителен.
Специфичност
HPLC: В сравнение с LCMS, HPLC анализът е по-малко специфичен.
LCMS: В сравнение с HPLC, LCMS анализът е по-специфичен.
Точност
HPLC: HPLC дава по-малко точни резултати от LCMS за определяне на някои химикали.
LCMS: LCMS дава по-точни резултати от HPLC за определяне на някои химикали.
Съставна част
HPLC: HPLC може да се разглежда като компонент на LCMS.
LCMS: LCMS не може да се разглежда като компонент на HPLC.
Източник на йони
HPLC: Източник на йони не съществува в HPLC инструмента.
LCMS: Източникът на йони присъства в инструмента LCMS.
Приложения
HPLC: Йони, полимери, органични молекули и биомолекули могат да бъдат анализирани с помощта на HPLC.
LCMS: Могат да се анализират органични молекули и биомолекули. За разлика от HPLC, LCMS може да се използва за изследване на непълно разтворени смеси.
Операция
HPLC: Диаграмата на HPLC инструмент е дадена на фигура 1 и обикновено включва автосамплер, помпи и детектор. Пробоотборникът въвежда пробната смес в подвижната фаза (смес под налягане от разтворители като вода, ацетонитрил и / или метанол), която я пренася в колоната. Помпите доставят желания поток и състав на подвижната фаза през колоната. Колоната е пълна с адсорбент, който е зърнеста твърда частица като силициев диоксид или полимери. Детекторът произвежда сигнал, пропорционален на количеството присъстващ компонент на пробата в колоната, поради което позволява количествено анализиране на избраните съставни части на пробата. HPLC инструментът се контролира, а анализът на данните се осигурява от цифров микропроцесор и потребителски софтуер.
Фигура 1: Диаграма на HPLC инструмент
LCMS: Диаграмата на LCMS инструмента е дадена на фигура 2. Екстрактът от пробата се вмъква в колоната, състояща се от HPLC. Тази колона задържа пробни метаболити въз основа на физически характеристики и различни метаболити преминават към масспектрометъра на различни интервали от време. Масспектроскопията се използва за оценка на масите на частиците, за определяне на елементарното разположение на молекулата и за изясняване на молекулните структури. Пробата обаче трябва да се йонизира, за да се генерират заредени молекули, за да се определят техните съотношения маса-заряд. Следователно, вместо HPLC инструменти, LCMS се състоят от допълнителни три модула като източник на желязо, анализатор на масата и детектор. Йонен източник може да трансформира проба от газова фаза в йони и анализатор на масата, групирайки йоните по техните маси, използвайки електромагнитни полета. И накрая,детектор количествено определя стойностите и предоставя данни за всеки йон, присъстващ в пробата. Техниката LCMS може да се използва както за качествени, така и за количествени приложения.
Фигура 2: Диаграма на LCMS инструмент
В заключение, HPLC е метод на течна хроматография, докато LCMS е комбинация от течна хроматография и масспектрометрия. И двете техники за анализ имат различни характеристики, но те могат да се използват за идентифициране и количествено определяне на хранителни състави, фармацевтични продукти и други биоактивни молекули.
