Ключова разлика - имунофлуоресценция срещу имунохистохимия
Диагностиката на заболяванията, която използва молекулярно-биологични методи, се превърна в нововъзникваща област на клиничната лаборатория. Той включва всички тестове и методи за идентифициране на заболяване и разбиране на причината за болестта чрез анализ на ДНК, РНК или експресирани протеини в организма. Бързият напредък в молекулярната диагностика даде възможност за основни изследвания на заразни и незаразни болести. Те се използват за определяне на промени в последователността или нивата на експресия в ключови гени или протеини, участващи в заболяването. Имунофлуоресценцията (IF) и имунохистохимията (IHC) са две толкова широко използвани техники в биологията на рака. IF е вид IHC, където методът за откриване на флуоресценция се използва за анализ на моноклонални и поликлонални антитела, докато IHC използва химически базирани методи за откриване на моноклонални и поликлонални антитела. Това е ключовата разлика между IF и IHC.
СЪДЪРЖАНИЕ
1. Общ преглед и ключова разлика
2. Какво е имунофлуоресценция
3. Какво е имунохистохимия
4. Прилики между имунофлуоресценцията и имунохистохимията
5. Равно до сравнение - Имунофлуоресценция срещу имунохистохимия в таблична форма
6. Резюме
Какво е имунофлуоресценция (IF)?
Имунофлуоресценцията е техника за откриване, при която антителата, използвани в анализа, са маркирани с помощта на флуоресцентни багрила или флуоресцентни протеини за целта на откриване. Маркираните вторични антитела могат да доведат до нежелани фонови сигнали; следователно, IF техниката се основава на маркиране на самото първично антитяло в момента, за да се избегнат нежелани сигнали по време на откриване. Чрез тази техника се предотвратява неспецифично свързване между първичното и вторичното антитяло и то е по-бързо, тъй като не се включва стъпка на вторична инкубация. Качеството на данните също се подобрява.
Фигура 01: Двойно имунофлуоресцентно оцветяване за BrdU, NeuN и GFAP
Флуорохромите или флуоресцентните багрила са съединения, които могат да абсорбират лъчение, за предпочитане ултравиолетово лъчение, което се възбужда. Когато частиците достигнат основното състояние от възбудено състояние, те излъчват лъчение, което се улавя и открива от детектор, за да образува спектър. От голямо значение е флуоресцентният етикет да е съвместим и стабилен за конкретната реакция и той трябва да бъде правилно конюгиран с антитялото, за да се получат точни резултати. Един от най-използваните флуорохроми е флуоресцеиновият изотиоцианат (FITC), който е със зелен цвят, с дължина на вълните на абсорбция и емисия съответно 490 nm и 520 nm. Родаминът, друг агент, използван в IF, е с червен цвят и има отчетливи дължини на вълни на абсорбция и емисия от 553 nm и 627 nm.
Какво е имунохистохимия (IHC)?
IHC е метод на молекулярно тестване, практикуван с цел идентифициране и потвърждаване на присъствието на антигена в прицелната клетка. Целевата клетка може да бъде инфекциозна частица, микробен патоген или злокачествена туморна клетка. IHC използва моноклонални и поликлонални антитела, за да определи присъствието на антигени, присъстващи на клетъчната повърхност на целевите клетки. Техниката се основава на свързване антиген-антитяло. Детекционен маркер е конюгиран с тези антитела, за да се открие присъствието или отсъствието на конкретния антиген. Тези маркери могат да бъдат химически маркери като ензими, флуоресцентно маркирани антитела или радиомаркирани антитела.
Фигура 02: Резен на мишка и мозък, оцветен от имунохистохимия
Най-популярното приложение на IHC е в биологията на раковите клетки за идентифициране на наличието на злокачествени тумори, но се използва и за откриване на инфекциозни заболявания.
Какви са приликите между имунофлуоресценцията и имунохистохимията?
- Имунофлуоресценция и имунохистохимия се провеждат при in vitro условия.
- И двете техники се основават на антиген-антитяло
- И двете са много бързи техники.
- Резултатите от техниките са възпроизводими.
- И двете имат подобрено качество на данните.
- Тези техники, използвани в диагностиката на рак и инфекциозни заболявания.
Каква е разликата между имунофлуоресценцията и имунохистохимията?
Различна статия Средна преди таблица
Имунофлуоресценция срещу имунохистохимия |
|
| IF е техника за откриване, при която антителата, използвани в анализа, са маркирани с използване на флуоресцентни багрила или флуоресцентни протеини за откриване. | IHC е техника за откриване, при която антителата, използвани в анализа, са маркирани с помощта на химикали или радиоактивни елементи за откриване. |
| Точност | |
| Точността е по-висока при IF техниката в сравнение с IHC. | Точността е по-ниска при IHC. |
| Специфичност | |
| IF е по-специфичен. | IHC е по-малко специфичен. |
Резюме - Имунофлуоресценция срещу имунохистохимия
Молекулярните механизми доведоха до много промени в областта на медицината, като породиха усъвършенствани молекулярни методи за тестване, които доведоха до революции в областта на диагностиката. Тези изобретения са довели до бързо и точно идентифициране и потвърждаване на болестта, като по този начин позволяват успешното прилагане и производство на лекарства. Тези техники се използват и във фармакологията, за да се намерят целите на лекарствата и да се потвърдят фармакокинетичните свойства на лекарството по време на лекарствения метаболизъм. IF и IHC са два диагностични метода, които се основават на концепцията за свързване на антиген и антитела, въпреки че начинът на откриване и в двете техники се различава. IF използва принципа на флуоресценцията за откриване на антигена, а IHC използва концепцията за химично конюгиране за откриване на антигена. Това е разликата между IF и IHC.
Изтеглете PDF версия на имунофлуоресценцията срещу имунохистохимията
Можете да изтеглите PDF версия на тази статия и да я използвате за офлайн цели според бележката към цитата. Моля, изтеглете PDF версия тук Разлика между имунофлуоресценцията и имунохистохимията.
