Ключова разлика - Преходна срещу стабилна трансфекция
Трансфекцията е процес, който участва в генния трансфер на еукариотни клетки, използвайки химически или физични методи. Трансфекцията може да бъде класифицирана в два основни типа, наречени преходна трансфекция и стабилна трансфекция. По време на преходна трансфекция, генът, който представлява интерес, не успява да се интегрира с генома на гостоприемника и се експресира временно в гостоприемника за кратко време, докато при стабилна трансфекция генът, който представлява интерес, се интегрира с генома на гостоприемника и се поддържа дългосрочно в няколко поколения. Това е ключовата разлика между преходната и стабилната трансфекция. И в двата случая трансфекцията е успешна и се експресират гени.
СЪДЪРЖАНИЕ
1. Преглед и ключова разлика
2. Какво е преходна трансфекция
3. Какво е стабилна трансфекция
4. Сравнение рамо до рамо - Преходна срещу стабилна трансфекция
5. Обобщение
Какво е преходна трансфекция?
Трансфекцията е важен инструмент за вмъкване на гени в еукариотните клетки. Сред двата вида трансфекция, преходната трансфекция е често срещан начин при генния трансфер. Чрез вектор чуждите гени се трансформират в клетките на гостоприемника. След като чуждата ДНК навлезе в клетката гостоприемник, тя има две възможности. Той може да се интегрира с генома на гостоприемника и да се репликира, или да остане вътре, без да се интегрира в генома. Преходната трансфекция показва временната експресия на вмъкнатите гени, без да се интегрира в генома на гостоприемника. Гените експресират и произвеждат кодирания протеин, докато клетката се раздели. Въпреки това, поради невъзможността за интеграция, тя не може да се възпроизведе и да влезе в бъдещите поколения. Този вид трансфекция е успешен за кратък период от време. По време на клетъчното делене или поради някои други фактори, чуждата ДНК се подлага на разграждане. Преходна трансфекция е показана, когато чуждото ДНК е под формата на силно навита ДНК.
Фигура 01: Преходна трансфекция
Какво е стабилна трансфекция?
Стабилната трансфекция показва успешна интеграция на чужди гени в генома на гостоприемника. След като чуждата ДНК влезе вътре в клетката гостоприемник, част от чуждата ДНК се интегрира с генома на гостоприемника и става част от него. Следователно чуждата ДНК също се репликира и преминава в бъдещите поколения, когато генома на гостоприемника се репликира. Този вид трансфекция е сложен и рядък. Въпреки това, поради стабилната трансфекция в генома, тази характеристика се поддържа за по-дълъг период от няколко поколения.
Стабилната трансфекция е труден процес и изисква ефективно доставяне на ДНК и клетъчно придобиване на чуждата ДНК в нейния геном. Следователно линейната ДНК благоприятства стабилната трансфекция, отколкото кръговата ДНК. Въпреки това, стабилната скорост на трансфекция е приблизително една на 10 4 трансформирани клетки. Стабилна трансфекция може да се наблюдава чрез котрансфомация на избираем маркер и извършване на изкуствената селекция върху среда.
Фигура 02: Стабилна трансфекция
Каква е разликата между преходна и стабилна трансфекция?
Различна статия Средна преди таблица
Преходна срещу стабилна трансфекция |
|
| Чуждата ДНК не се интегрира в генома на гостоприемника. | Чуждата ДНК се интегрира с генома на гостоприемника и става част от него. |
| Репликация в хоста | |
| Временно трансфектираните гени не се репликират в гостоприемника. Следователно гените не се предават на следващите поколения. | Гените се репликират в хоста и се предават на бъдещите поколения. |
| Времетраене на генната експресия | |
| Гените се изразяват за краен период от време и след това те се унищожават. | Гените стават част от генома и се изразяват в поколението за дълъг период от време. |
| Използвайте | |
| Това е полезно за изучаване на ефектите от краткосрочната експресия на гени или генни продукти. | Това е полезно за изучаване на ефектите от генната експресия в дългосрочен план. |
| Откриване на трансфекцията | |
| Гените се експресират и могат лесно да бъдат открити чрез вмъкване на репортерен ген. | Стабилната трансфекция може лесно да бъде открита чрез вмъкване на избираем маркер и избор чрез изкуствен подбор върху носител. |
| Възникване и процес | |
| Преходната трансфекция е често срещана и не е сложна за извършване. | Стабилната трансфекция се среща рядко и е сложна за извършване. |
| Същност на ДНК | |
| Силно сгънатата ДНК е подходяща за преходна трансфекция. | Линейните ДНК са подходящи за стабилна трансфекция. |
| Приложения | |
| Това се използва за проучвания на нокдаун на ген или заглушаване с инхибиторни РНК, производство на протеини в малък мащаб | Това се използва за производство на протеини в мащабни, по-дългосрочни фармакологични проучвания, генна терапия, изследвания на механизмите на дългосрочната генетична регулация |
Резюме - Преходна срещу стабилна трансфекция
Преходните и стабилните трансфекции са два вида трансфекции, показани по време на трансфера на гена в еукариотни клетки от невирусни базирани системи. Трансформираната чужда ДНК не се интегрира с генома на гостоприемника при преходна трансфекция, докато се интегрира с генома на гостоприемника при стабилна трансфекция. ДНК с кръгови навивки е показана преходна трансфекция, докато линейната ДНК предпочита стабилна трансфекция. Това е разликата между преходна и стабилна трансфекция. Преходната трансфекция обаче е по-често срещана и лесна в сравнение със стабилната трансфекция. Но изборът на един от двамата зависи от целта на генетичния трансфер и продължителността на изследователския проект.
