Основна разлика - нитроцелулоза срещу найлонова мембрана
Блотингът е важна техника за откриване на специфични последователности на ДНК, РНК и протеини от техните смеси в молекулярната биология. Това се прави с помощта на мембрана, наречена петно. Има различни техники за попиване като северно, южно и западно попиване. Изборът на подходяща мембрана за процеса на попиване трябва да се извърши внимателно, за да се предотврати неспецифично свързване и грешни откривания. Нитроцелулозата, найлонът и PVDF са често използвани мембрани в попивателните техники. Те имат различни характеристики. Ключовата разлика между нитроцелулозата и найлоновата мембрана е, че нитроцелулозните мембрани имат висок потенциал на белтъчно имобилизиране, докато найлоновите мембрани имат висок потенциал на имобилизиране на нуклеиновите киселини. И двата типа мембрани често се използват в техниките за попиване.
СЪДЪРЖАНИЕ
1. Общ преглед и ключова разлика
2. Какво представлява нитроцелулозната мембрана
3. Какво представлява найлоновата мембрана
4. Сравнение рамо до рамо - Нитроцелулоза срещу найлонова мембрана
5. Обобщение
Какво представлява нитроцелулозната мембрана?
Нитроцелулозната мембрана е често използван мембранен филтър в техниките за попиване на нуклеинова киселина и протеини. Той има висок потенциал за свързване с протеини. Следователно нитроцелулозните мембрани се използват широко в техниката на уестърн блотинг. Нитроцелулозните мембрани са съвместими с всички техники на хибридизация и показват превъзходни способности за свързване без смущения. Нитроцелулозните мембрани са естествено хидрофилни по природа. Те осъществяват хидрофилно взаимодействие с молекулите и ефективно ги имобилизират върху мембраната. Търговските нитроцелулозни мембрани се предлагат в два размера на порите: 0,45 и 0,2 µm.
Фигура 01: Нитроцелулозна мембрана, използвана при Western blotting
Какво е найлонова мембрана?
Найлоновата мембрана е друг вид търговска мембрана, използвана в попивателни техники. Алтернативно се използва с нитроцелулозни мембрани за южно и северно попиване. Найлоновите мембрани са идеални за южно попиване, отколкото нитроцелулозата поради техния висок афинитет към свързване с ДНК. Поради няколко уникални характеристики на найлоновите мембрани, изследователите често използват найлонови мембрани за южно и северно попиване, вместо върху нитроцелулозна мембрана. Найлоновите мембрани също се препоръчват за отстраняване и повторно сондиране, за разлика от нитроцелулозата.
Фигура 02: Найлонова мембрана, използвана за южно попиване
Каква е разликата между нитроцелулозата и найлоновата мембрана?
Различна статия Средна преди таблица
Нитроцелулоза срещу найлонова мембрана |
|
| Нитроцелулозните мембрани са чупливи. | Найлоновите мембрани са по-малко чупливи. |
| Боравене | |
| Те са трудни за боравене. | С тях се работи лесно. |
| Порицание | |
| Неподдържаните нитроцелулозни мембрани са трудни за изследване. | Усъвършенстването е лесно с найлонови мембрани. |
| Съвместимост с различни условия на съхранение | |
| Нитроцелулозните мембрани имат по-малка якост, за да издържат на различни условия на съхранение. | Найлоновите мембрани реагират по-стабилно на различни условия на съхранение. |
| Използвайте | |
| Необходимо е предварително намокряне. | За найлонови мембрани не се изисква предварително намокряне. |
| Хидрофилна природа | |
| Нитроцелулозните мембрани имат хидрофилен характер, но са по-малко хидрофилни от найлоновите мембрани. | Те са силно хидрофилни по природа. |
| Потенциал за обездвижване | |
| Нитроцелулозните мембрани имат по-малък афинитет към нуклеиновите киселини. Но има висок афинитет към протеините. | Найлоновите мембрани имат висок потенциал на свързване с нуклеинови киселини, отколкото нитроцелулозните мембрани. |
Резюме - Нитроцелулоза срещу найлонова мембрана
Нитроцелулозните и найлоновите мембрани са специални листове, използвани в попивателната техника, за да се възпроизведе шарката на гела. Те дават възможност за откриване на определена последователност или протеин от смесите, като ги имобилизират върху мембраната. След като молекулите се имобилизират върху мембраната, тя може да се използва като субстрат за хибридизационен анализ с маркирани сонди. Нитроцелулозната мембрана обикновено се използва за откриване на протеини в техниката на Western blot, поради високия си афинитет на свързване с протеини. Найлоновите мембрани често се използват за южно и северно попиване. Това е разликата между нитроцелулозата и найлоновата мембрана.
