Ключова разлика - поточна цитометрия срещу FACS
В контекста на клетъчната теория клетките са основната структурна и функционална единица на всички живи организми. Сортирането на клетки е методология, която се използва за разделяне на различни клетки според физиологичните и морфологичните особености. Те могат да бъдат с вътреклетъчни или извънклетъчни характеристики. Взаимодействието на ДНК, РНК и протеини се считат за вътреклетъчни интерактивни свойства, докато формата, размерът и различните повърхностни протеини се считат за извънклетъчни свойства. В съвременната наука методологиите за сортиране на клетки доведоха до подпомагане на различните изследвания в биологичните изследвания, а също и при установяването на нови принципи чрез изследвания в медицината. Сортирането на клетки се извършва по различни методологии, които включват както примитивни с по-малко оборудване, така и усъвършенствани технологични методологии с използване на сложни машини. Проточна цитометрия, флуоресцентно активирано клетъчно сортиране (FACS), подбор на магнитни клетки и сортиране на единични клетки са основните използвани методологии. Проточната цитометрия и FACS са разработени за диференциране на клетките според техните оптични свойства. FACS е специализиран тип поточна цитометрия. Поточната цитометрия е методология, която се използва по време на анализ на хетерогенна популация от клетки в зависимост от различни молекули на повърхността, размера и обема, което позволява изследването на единични клетки. FACS е процес, при който пробна смес от клетки се сортира според техните характеристики на разсейване на светлината и флуоресценция в два или повече контейнера. Това е ключовата разлика между поточната цитометрия и FACS.
СЪДЪРЖАНИЕ
1. Общ преглед и ключова разлика
2. Какво е поточна цитометрия
3. Какво е FACS
4. Прилики между поточна цитометрия и FACS
5. Сравнение едно до друго - поточна цитометрия срещу FACS в таблична форма
6. Резюме
Какво представлява поточната цитометрия?
Проточната цитометрия е метод, който се използва за изследване и определяне на експресията на вътреклетъчни молекули и клетъчната повърхност и за определяне и характеризиране на различни видове клетки. Също така се използва при определяне на клетъчния обем и размера на клетките и за оценка на чистотата на изолираните субпопулации. Това позволява многопараметрична оценка на единични клетки по едно и също време. Поточната цитометрия се използва за измерване на интензивността на флуоресценция, която се получава поради флуоресцентно маркирани антитела, които помагат да се идентифицират протеини или лиганди, които се свързват със свързани клетки.
Фигура 01: Поточна цитометрия
Като цяло, поточната цитометрия включва предимно три подсистеми. Те са флуидите, електрониката и оптиката. В поточната цитометрия се предлагат пет основни компонента, които се използват при сортиране на клетки. Те са, поточна клетка (поток от течност, който се използва за транспортирането им и подравняване на клетките за процес на оптично засичане), система за измерване (може да бъде от различни системи, включително, живачни и ксенонови лампи, водно охлаждане с висока мощност или лазери с въздушно охлаждане с ниска мощност или диодни лазери), ADC; Аналогов към цифров преобразувател, система за усилване и компютър за анализ. Придобиването е процес, при който данните се събират от пробите с помощта на проточен цитометър. Този процес се опосредства от компютър, който е свързан с проточния цитометър. Присъстващият в компютъра софтуер анализира информацията, подавана към компютъра от поточния цитометър. Софтуерът също така има възможност за регулиране на параметрите на експеримента, контролирайки поточния цитометър.
Какво е FACS?
В контекста на поточната цитометрия, активираното от флуоресценция сортиране на клетки (FACS) е метод, който се използва за диференциране и сортиране на проба от смес от биологични клетки. Клетките са отделени от два или повече контейнера. Методът за сортиране се основава на физическите характеристики на клетката, което включва разсейване на светлината и флуоресцентни характеристики на клетката. Това е важна научна техника, която може да се използва за получаване на надеждни количествени и качествени резултати от флуоресцентни сигнали, които се излъчват от всяка клетка. По време на FACS, първоначално, предварително получената смес от клетки; суспензия е насочена към центъра на тесен поток течност, който тече бързо. Потокът от течност е проектиран така, че да отделя клетките в суспензията въз основа на диаметъра на всяка клетка. Към потока от суспензия се прилага вибрационен механизъм, който води до образуването на отделни капчици.
Фигура 02: FACS
Системата е калибрирана, за да се създаде една капчица с една клетка. Точно преди образуването на капчици, суспензията на потока се движи по апарат за измерване на флуоресценция, който открива флуоресцентната характеристика на всяка клетка. В точката на образуване на капчици се поставя електрически пръстен за зареждане, който се зарежда към пръстена преди измерването на интензивността на флуоресценцията. След като капчиците се образуват от суспензионния поток, в капките се улавя заряд, който след това влиза в електростатична деформационна система. Според заряда системата отклонява капчиците в различни контейнери. Методът на прилагане на заряда варира в зависимост от различните системи, използвани в FACS. Оборудването, използвано във FACS, е известно като флуоресцентно активиран клетъчен сортиращ апарат.
Каква е приликата между поточната цитометрия и FACS?
Проточната цитометрия и FACS са разработени за диференциране на клетките според техните оптични свойства
Каква е разликата между поточната цитометрия и FACS?
Различна статия Средна преди таблица
Поточна цитометрия срещу FACS |
|
| Поточната цитометрия е методология, която се използва по време на анализ на хетерогенна популация от клетки в зависимост от различни молекули на повърхността, размера и обема, което позволява изследването на единични клетки. | FACS е процес, при който пробна смес от клетки се сортира според техните характеристики на разсейване на светлината и флуоресценция в два или повече контейнера. |
Резюме - Поточна цитометрия срещу FACS
Клетката е основната структурна и функционална единица на всички живи организми. Сортирането на клетки е процес, при който клетките се изолират и диференцират в различни категории въз основа на техните вътреклетъчни и извънклетъчни свойства. Проточната цитометрия и FACS са две важни методологии при сортирането на клетките. И двата процеса са разработени за диференциране на клетките според техните оптични свойства. Поточната цитометрия е методология, която се използва по време на анализ на хетерогенна популация от клетки в зависимост от различни молекули на повърхността, размера и обема, което позволява изследването на единични клетки. FACS е процес, при който пробна смес от клетки се сортира според техните характеристики на разсейване на светлината и флуоресценция в два или повече контейнера. Това е разликата между поточната цитометрия и FACS.
Изтеглете PDF версията на Flow Cytometry vs FACS
Можете да изтеглите PDF версия на тази статия и да я използвате за офлайн цели според бележката към цитата. Моля, изтеглете PDF версия тук Разлика между поточната цитометрия и FACS
