Ключовата разлика между хексокиназата и глюкокиназата е, че хексокиназата присъства във всички тъкани, различни от черния дроб и бета-клетките на панкреаса, докато глюкокиназата присъства само в черния дроб и бета-клетките на панкреаса.
Хексокиназата и глюкокиназата са два изоензима, които катализират една и съща реакция на две различни места. Те превръщат глюкозата в глюкоза 6-фосфат, което е първата реакция на гликолиза. Следователно, използвайки АТФ, те добавят фосфатна група към глюкозата и модифицират структурата. Тези два ензима обаче споделят прилики, както и разлики, които ще обсъдим тук.